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KQ-300DB在洞庭碧螺春的鑒別分析的使用

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2019-09-10 08:52【

碧螺春茶作為我國(guó)十大名茶之一,自古以來就受到了人們的廣泛關(guān)注和喜愛。碧螺春茶所含的茶多 酚、兒茶素、氨基酸等含量較高,而且味道鮮濃、口感醇厚。但是,隨著碧螺春產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展與擴(kuò)大, 當(dāng)前洞庭碧螺春茶出現(xiàn)了產(chǎn)品品質(zhì)參差不齊、假冒偽劣產(chǎn)品泛濫等諸多問題,嚴(yán)重影響了碧螺春茶產(chǎn)業(yè) 的可持續(xù)發(fā)展。因此,有必要對(duì)碧螺春茶進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)和真?zhèn)舞b別,進(jìn)而保護(hù)名優(yōu)茶的獨(dú)特品質(zhì)。



1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料


1) 采用各等級(jí)碧螺春春茶作為試驗(yàn)樣品。樣品均來自蘇州市吳中區(qū)洞庭東山的6個(gè)廠家以及洞庭 西山的4個(gè)廠家,且包含特級(jí)一等、特級(jí)二等、一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)等5個(gè)等級(jí),按照洞庭碧螺春茶感官指標(biāo) 的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)對(duì)廠家的各等級(jí)茶樣進(jìn)行嚴(yán)格挑選,所有茶樣均采用自封袋進(jìn)行獨(dú)立密封包裝,并將其存放 于-20 ℃冰箱中。將洞庭東山6個(gè)廠家的樣品依次標(biāo)記為A、B、C、D、E、F,洞庭西山4個(gè)廠家的樣品依次 標(biāo)記為G、H、I、J,此外,碧螺春茶的5個(gè)等級(jí)依次標(biāo)記為T1、T2、1、2、3。

2) 試驗(yàn)試劑主要為甲醇、丙酮、氯仿和無水乙醇等試劑,均為分析純。

3) 試驗(yàn)主要設(shè)備為電子天平(SQP,賽多利斯科學(xué)儀器有限公司);高速萬能粉碎機(jī)(FW100,天津市 泰斯特儀器有限公司);數(shù)控超聲波清洗器(KQ-300DB,昆山市超聲儀器有限公司);紫外-可見分光光 度計(jì)(UV-1800,日本島津公司)。



1.2 試驗(yàn)方法

1) 樣品處理:將購買的碧螺春茶樣品用高速萬能粉碎機(jī)粉碎后,過60目篩,放于自封袋中備用。準(zhǔn) 確稱取樣品0.300 0 g,置于25 mL具塞刻度試管中,加入95%甲醇20 mL,將試管進(jìn)行密塞,超聲提取 40 min后過濾得到其濾液,取1 mL濾液置于100 mL容量瓶中并用95%甲醇定容,搖勻待測(cè)。

2) 測(cè)試條件:將待測(cè)的提取液用UV-1800紫外可見分光光度計(jì)以相應(yīng)溶劑調(diào)整基線,并作為參比 溶液進(jìn)行紫外光譜掃描,設(shè)定掃描波長(zhǎng)范圍為190~400 nm,狹縫為1 nm,采樣間隔為0.2 nm,每個(gè)樣品 重復(fù)測(cè)定3次。

3) 提取溶劑優(yōu)化:以AT2樣品為考察對(duì)象,準(zhǔn)確稱取0.300 0 g樣品3份,置于25 mL具塞刻度試管 中,分別加入超純水、95%甲醇、95%乙醇、95%丙酮、氯仿各20 mL,超聲提取50 min后過濾得到其濾液, 并將各濾液分別稀釋10、25、50、100倍之后進(jìn)行紫外光譜掃描測(cè)定。

4) 超聲時(shí)間優(yōu)化。以AT2樣品為考察對(duì)象,準(zhǔn)確稱取0.300 0 g樣品3份,置于25 mL具塞刻度試管 中,加入95%甲醇20 mL后密塞,分別超聲提取20 min、30 min、40 min、50 min后過濾得到其濾液,取1 mL 濾液置于100 mL容量瓶中并用95%甲醇定容,搖勻后進(jìn)行紫外光譜掃描測(cè)定。

5) 精密度試驗(yàn):以AT2樣品為考察對(duì)象,采用上述樣品處理方法和測(cè)試條件進(jìn)行紫外光譜掃描,重 復(fù)測(cè)定7次,計(jì)算吸收波長(zhǎng)的平均相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD,考察精密度。

6) 重復(fù)性試驗(yàn):以AT2樣品為考察對(duì)象,采用上述樣品處理方法處理樣品,分別稱取7份,以上述測(cè)試條件進(jìn)行紫外光譜掃描,計(jì)算吸收波長(zhǎng)的平均相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD,考察重復(fù)性。

7) 穩(wěn)定性試驗(yàn):以AT2樣品為考察對(duì)象,經(jīng)本研究的試驗(yàn)方法處理的樣品,分別在0、2、4、6、8、10、 24 h處理,以本研究的測(cè)試條件進(jìn)行紫外光譜掃描,計(jì)算吸收波長(zhǎng)的平均相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD,考察穩(wěn)定性。



2 結(jié)果與分析

洞庭碧螺春茶樣品分別用超純水、95%甲醇、95%乙醇、95%丙酮、氯仿等溶劑進(jìn)行提取后,由紫外 光譜圖可知,以95%甲醇為提取劑的色譜吸收峰數(shù)目最多,表明洞庭碧螺春茶化學(xué)成分被提取的最充 分。而且當(dāng)濾液稀釋100倍時(shí)特征峰明顯,有利于對(duì)不同碧螺春茶樣品進(jìn)行區(qū)分,因此,選擇95%甲醇作 為最佳提取溶劑,并將濾液稀釋100倍后進(jìn)行紫外光譜掃描。碧螺春茶樣品超聲提取時(shí)間分別為20 min、30 min、40 min、50 min后,超聲結(jié)果表明,當(dāng)以95%甲 醇為提取劑的超聲時(shí)間為20 min時(shí),吸收峰數(shù)目最少;30 min次之;當(dāng)超聲40 min和50 min時(shí),吸收峰數(shù) 目變化不大。因此,選擇最佳提取時(shí)間為40 min。紫外指紋圖譜是由于不同物質(zhì)體系化學(xué)成分含量和不飽和程度的差異,導(dǎo)致峰形、峰高、峰面積等 具有差異,因而可通過對(duì)不同物質(zhì)體系的紫外指紋 圖譜進(jìn)行鑒別分析。50個(gè)碧螺春茶的紫外指紋圖譜 疊加后如圖1所示。由圖1可知,不同產(chǎn)地、不同等級(jí) 碧螺春茶之間原始圖譜的出峰位置和峰形相似,但 吸光度大小均具有差異。結(jié)果表明,各碧螺春茶樣品 之間的主要化學(xué)成分組成相似,但含量存在差異,具 有指紋特性。



3 數(shù)據(jù)處理

將所測(cè)50個(gè)碧螺春茶樣品的原始紫外指紋圖譜數(shù)據(jù)導(dǎo)入U(xiǎn)V-Probe 2.43中進(jìn)行一階求導(dǎo)的處理, 然后分別將原始數(shù)據(jù)和一階求導(dǎo)后的數(shù)據(jù)導(dǎo)入SIMCA-P 14.0軟件進(jìn)行單位方差換算(unit variance scaling)后,再進(jìn)行主成分分析以及偏最小二乘判別分析。主成分分析法(PCA)是一種將原來反映樣品信息的多個(gè)變量進(jìn)行整合,壓縮成少數(shù)幾個(gè)綜合變量, 可以用二維圖直觀反映樣品信息的統(tǒng)計(jì)分析方法。同時(shí),它也是一種非監(jiān)督模式識(shí)別方法。將碧 螺春茶樣品的原始紫外光譜數(shù)據(jù)和一階求導(dǎo)數(shù)據(jù)導(dǎo)入SIMCA-P 14.0軟件中,經(jīng)過單位方差換算處理 后,進(jìn)行主成分分析,用以區(qū)分碧螺春茶的不同產(chǎn)地和不同等級(jí)。偏最小二乘判別分析(PLS-DA)是一種監(jiān)督模式識(shí)別方法,根據(jù)吸收值差異建立區(qū)別樣品模型。 它可以分別提取自變量和因變量中能最大代表其特性的潛在變量,并對(duì)潛在變量進(jìn)行線性或非線性 回歸建模,最終來預(yù)測(cè)方法的可行性。將50個(gè)碧螺春茶樣品的紫外指紋圖譜的吸收波長(zhǎng)和相應(yīng) 的吸光值導(dǎo)入SIMCA-P 14.0軟件中,選擇PLS-DA進(jìn)行分析。



4 結(jié)論與討論

1) 紫外光譜法具有操作方便、高效率、低成本等優(yōu)點(diǎn),已經(jīng)被越來越多地應(yīng)用到食品、制藥、化工等 領(lǐng)域。本試驗(yàn)通過對(duì)50個(gè)碧螺春茶樣品進(jìn)行紫外光譜掃描,將所得紫外指紋圖譜原始數(shù)據(jù)和一階求 導(dǎo)數(shù)據(jù)導(dǎo)入SIMCA-P 14.0軟件中進(jìn)行主成分分析,據(jù)此反映樣品之間的相關(guān)性,同時(shí)利用具有監(jiān)督模 式的偏最小二乘判別分析對(duì)潛在變量進(jìn)行模型的建立,最終預(yù)測(cè)方法的可行性。

2) 通過試驗(yàn)確定了碧螺春茶的最佳提取溶劑為95%甲醇,最佳提取時(shí)間為40 min。碧螺春茶紫外光 譜曲線重現(xiàn)性好、穩(wěn)定性高。不同產(chǎn)地和不同等級(jí)碧螺春茶的紫外指紋圖譜峰形比較相似,但吸光度不 同,表明不同產(chǎn)地和不同等級(jí)之間的樣品化學(xué)成分含量有一定的差異。





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